ትክክለኛውን ትኩረት እንዴት እንደሚወስኑ?
ለኢንደስተር IPTG (isopropyl-beta-d-thiogalactoside) ከፍተኛ ትኩረትን, የተሻለ ይሆናል.በጣም ጥሩው ትኩረት የሚወሰነው በተወሰኑ የሙከራ ሁኔታዎች እና በሚፈለገው የኢንደክሽን ውጤት ላይ ነው.
በአጠቃላይ የ IPTG ትኩረት በ 0.1-1 ሚሜ ክልል ውስጥ ጥቅም ላይ ይውላል.ዝቅተኛ ትኩረት በሴሎች እድገት ላይ አሉታዊ ተፅእኖዎችን ሊቀንስ እና በታለመላቸው ፕሮቲኖች ከመጠን በላይ በመጨመራቸው ምክንያት ሳይቶቶክሲካዊነትን ሊቀንስ ይችላል።ከፍተኛ ትኩረትን ከመጠን በላይ የሴል ሜታቦሊክ ሸክም ሊፈጥር ይችላል, ይህም የሕዋስ እድገትን እና የመግለፅን ውጤታማነት ይነካል.
ከፍተኛ ትኩረትን የሚወስንበት መንገድ የአይፒቲጂ ኢንዳክሽን ሙከራዎችን በተለያዩ መጠኖች በማካሄድ የታለመውን ፕሮቲን አገላለጽ ደረጃ መገምገም ሊሆን ይችላል።የአነስተኛ ደረጃ የባህል ፈተናዎች የተለያዩ የአይፒቲጂ ስብስቦችን (ለምሳሌ 0.1 ሚሜ፣ 0.5 ሚሜ፣ 1 ሚሜ፣ ወዘተ.) በመጠቀም ሊደረጉ የሚችሉ ሲሆን በተለያየ መጠን ያለው የገለጻ ውጤት ሊገመገም የሚችለው የታለመውን ፕሮቲን (ለምሳሌ ምዕራባዊ) የመግለጫ ደረጃ በመለየት ነው። ነጠብጣብ ወይም የፍሎረሰንት መለየት).በሙከራ ውጤቶቹ መሰረት, ምርጥ የመግለጫ ውጤት ያለው ትኩረት እንደ ምርጥ ትኩረት ተመርጧል.
በተጨማሪም ፣በተመሳሳይ የሙከራ ሁኔታዎች ውስጥ በተለምዶ ጥቅም ላይ የዋለውን የአይፒቲጂ ማጎሪያ ክልልን ለመረዳት እና ከዚያ በሙከራ ፍላጎቶች መሠረት ማመቻቸት እና ማስተካከል ከፈለጉ ተዛማጅ ጽሑፎችን ወይም የሌሎችን የላቦራቶሪዎችን ተሞክሮ ማየት ይችላሉ።
በጣም ጥሩው ትኩረት እንደ የተለያዩ የገለፃ ስርዓቶች ፣ የታለሙ ፕሮቲኖች እና የሙከራ ሁኔታዎች ሊለያይ እንደሚችል ልብ ሊባል የሚገባው ጉዳይ ነው ፣ ስለሆነም በእያንዳንዱ ሁኔታ ማመቻቸት የተሻለ ነው።
የፖስታ ሰአት፡ ሴፕቴምበር-28-2023