IPTG CAS: 367-93-1 የአምራች ዋጋ
Isopropyl β-D-1-thiogalactopyranoside (IPTG) በሞለኪውላር ባዮሎጂ ምርምር እና በባዮቴክኖሎጂ አፕሊኬሽኖች ውስጥ በተለምዶ ጥቅም ላይ የሚውለው የላክቶስ ሰው ሠራሽ አናሎግ ነው።IPTG በዋነኝነት የሚያገለግለው የጂኖችን አገላለጽ በባክቴሪያ ስርዓቶች ውስጥ ለማነሳሳት ሲሆን ይህም የታለመውን ጂኖች ቅጂ ለመጀመር እንደ ሞለኪውላዊ ቀስቅሴ ሆኖ ያገለግላል።
በእድገት ማእከላዊው ውስጥ ሲጨመር IPTG በባክቴሪያው ተወስዶ ከላክ ሪፕሬሰር ፕሮቲን ጋር ሊጣመር ይችላል, ይህም የላክ ኦፔሮን እንቅስቃሴን ይከላከላል.ላክ ኦፔሮን በላክቶስ ሜታቦሊዝም ውስጥ የሚሳተፉ የጂኖች ስብስብ ነው, እና የጭቆና ፕሮቲን ሲወገድ, ጂኖቹ ይገለፃሉ.
IPTG ብዙውን ጊዜ ጥቅም ላይ የሚውለው ከ lacUV5 ሚውታንት ፕሮሞተር ጋር ነው፣ እሱም በመሰረቱ ንቁ የሆነ የ lac አስተዋዋቂ ስሪት ነው።የአይፒቲጂ ኢንዳክሽንን ከዚህ ተለዋዋጭ አራማጅ ጋር በማጣመር ተመራማሪዎች ከፍተኛ የጂን አገላለፅን ማግኘት ይችላሉ።ይህ ከፍተኛ መጠን ያለው ፕሮቲን ለማጥራት ወይም ለሌላ የታችኛው ተፋሰስ አፕሊኬሽኖች ለማምረት ያስችላል።
ከጂን አገላለጽ በተጨማሪ፣ IPTG በሰማያዊ/ነጭ የማጣሪያ ምርመራዎች ላይም በተደጋጋሚ ጥቅም ላይ ይውላል።በዚህ ቴክኒክ፣ lacZ ጂን በተለምዶ ከፍላጎት ጂን ጋር የተዋሃደ ነው፣ እና ይህን ውህድ ጂን በተሳካ ሁኔታ የሚገልጹ ባክቴሪያዎች ንቁ β-galactosidase ኢንዛይም ይፈጥራሉ።IPTG እንደ X-gal ካለው ክሮሞጂካዊ ንጥረ ነገር ጋር ሲታከል፣ ውህደቱን የሚገልጹ ባክቴሪያዎች በ β-galactosidase እንቅስቃሴ ምክንያት ወደ ሰማያዊ ይቀየራሉ።ይህ የፍላጎት ዘረ-መል (ጅን) በተሳካ ሁኔታ የተዋሃዱ የእንደገና ዝርያዎችን ለመለየት እና ለመምረጥ ያስችላል.
የጂን አገላለጽ ማነሳሳት፡ IPTG በተለምዶ በባክቴሪያ ስርዓቶች ውስጥ የዒላማ ጂኖችን አገላለጽ ለማነሳሳት ይጠቅማል።ተፈጥሯዊውን ኢንደክተር ላክቶስ አስመስሎ ከላክ መጨመሪያ ፕሮቲን ጋር በማያያዝ የላክ ኦፔሮንን እንዳይዘጋ ይከላከላል።ይህ የሚፈለጉትን ጂኖች ወደ ቅጂ እና መግለፅ ያስችላል.
የፕሮቲን አገላለጽ እና ማጥራት፡- IPTG ኢንዳክሽን ብዙ ጊዜ ለተለያዩ ዓላማዎች እንደ ባዮኬሚካላዊ ጥናቶች፣ ቴራፒዩቲካል ምርት ወይም መዋቅራዊ ትንተና ላሉ ብዙ መጠን ያላቸውን ድጋሚ ፕሮቲን ለማምረት ያገለግላል።ተመራማሪዎች ተገቢ የገለጻ ቬክተሮችን እና የአይፒቲጂ ኢንዳክሽን በመጠቀም በባክቴሪያ አስተናጋጆች ውስጥ የታለመ የፕሮቲን ከፍተኛ ደረጃ ላይ መድረስ ይችላሉ።
ሰማያዊ/ነጭ ማጣሪያ፡ IPTG ከላክዜድ ጂን እና chromogenic substrate፣ እንደ X-gal፣ ለሰማያዊ/ነጭ የማጣሪያ ፈተናዎች በተደጋጋሚ ጥቅም ላይ ይውላል።የ lacZ ጂን በተለምዶ ከፍላጎት ጂን ጋር የተዋሃደ ነው፣ እና ይህን ውህድ ጂን በተሳካ ሁኔታ የሚገልጹ ባክቴሪያዎች ንቁ β-galactosidase ኢንዛይም ያመነጫሉ።አይፒቲጂ እና ክሮሞጂካዊ ንኡስ ክፍል ሲጨመሩ፣ ውህደቱን ጂን የሚገልጹ ድጋሚ ውጥረቶች ወደ ሰማያዊ ይቀየራሉ፣ ይህም በቀላሉ ለመለየት እና ለመምረጥ ያስችላል።
የጂን ቁጥጥር ጥናት፡ IPTG ኢንዳክሽን በተለምዶ የጂኖችን እና ኦፔሮንን በተለይም የላክ ኦፔሮንን ደንብ ለማጥናት በጥናት ላይ ይውላል።ተመራማሪዎች የ IPTG ን ስብስቦችን በመቆጣጠር እና የላክ ኦፔሮን አካላትን አገላለጽ በመከታተል የጂን መቆጣጠሪያ ዘዴዎችን እና የተለያዩ ምክንያቶችን ወይም ሚውቴሽን ሚናን መመርመር ይችላሉ።
የጂን አገላለጽ ሥርዓቶች፡- IPTG እንደ T7 አራማጅ-ተኮር ሥርዓቶች ባሉ በርካታ የጂን አገላለጽ ሥርዓቶች ውስጥ ወሳኝ አካል ነው።በእነዚህ ስርዓቶች ውስጥ, የ lac ፕሮሞተር ብዙውን ጊዜ የ T7 አር ኤን ኤ ፖሊመሬዜሽን መግለጫን ለመንዳት ጥቅም ላይ ይውላል, እሱም በተራው, በ T7 አራማጅ ቅደም ተከተሎች ቁጥጥር ስር የዒላማ ጂኖችን ይገለበጣል.IPTG የ T7 አር ኤን ኤ ፖሊሜሬዜሽን አገላለጽ ለማነሳሳት ጥቅም ላይ ይውላል, ይህም ወደ ዒላማው የጂን አገላለጽ እንዲነቃ ያደርጋል.
| ቅንብር | C9H18O5S |
| አስይ | 99% |
| መልክ | ነጭ ዱቄት |
| CAS ቁጥር. | 367-93-1 |
| ማሸግ | ትንሽ እና ትልቅ |
| የመደርደሪያ ሕይወት | 2 አመት |
| ማከማቻ | በቀዝቃዛ እና ደረቅ ቦታ ውስጥ ያከማቹ |
| ማረጋገጫ | አይኤስኦ |
