4-ናይትሮፊኒል ቤታ-ዲ-ጋላክቶፒራኖሳይድ CAS፡200422-18-0

ተፅዕኖ፡ ONPG የኢንዛይም β-galactosidase መኖር እና እንቅስቃሴን ለመለየት የሚያገለግል ንጥረ ነገር ነው።β-galactosidase ኢንዛይም ሲኖር እና ሲሰራ፣ ONPGን በሁለት ምርቶች ይከፋል፡- o-nitrophenol እና የጋላክቶስ ተዋጽኦ።የ o-nitrophenol ነፃ መውጣቱ ቢጫ ቀለም ለውጥን ያመጣል, ይህም በ spectrophotometer በመጠቀም ሊለካ ይችላል.

መተግበሪያ፡ ONPG በሞለኪውላር ባዮሎጂ እና በባዮኬሚስትሪ ምርምር ውስጥ በርካታ መተግበሪያዎች አሉት።

የ β-galactosidase እንቅስቃሴን መወሰን፡ ONPG በተለምዶ የ β-galactosidase ኢንዛይም እንቅስቃሴን ለመለካት እና ለመለካት ጥቅም ላይ ይውላል።ከኤንዛይም እንቅስቃሴ ጋር በቀጥታ የሚመጣጠን የ o-nitrophenol አፈጣጠር መጠን በስፔክትሮፎቶሜትሪ ሊለካ ይችላል።

የጂን አገላለጽ እና ደንብ፡ ONPG ብዙውን ጊዜ ከጂን አገላለጽ እና ቁጥጥር ጥናቶች ጋር በተያያዙ ሙከራዎች ውስጥ ጥቅም ላይ ይውላል።በተወሰኑ አስተዋዋቂዎች ቁጥጥር ስር ያሉ የጂኖችን አገላለጽ ለማጥናት እንደ በተለምዶ ጥቅም ላይ የሚውለው የላክዜድ ውህደት ስርዓትን በመሳሰሉ የፕሮቲን ውህዶች ውስጥ በተደጋጋሚ ጥቅም ላይ ይውላል።ONPGን በመጠቀም የሚለካው የቤታ-ጋላክቶሲዳሴ እንቅስቃሴ የጂን አገላለጽ ደረጃ ላይ ግንዛቤዎችን ይሰጣል።

የ β-galactosidase እንቅስቃሴን ማጣራት፡ ONPG β-galactosidase የሚይዘውን የLacZ ጂን መኖር እና ተግባራዊነት ለመለየት በእንደገና ዲ ኤን ኤ ቴክኖሎጂ እንደ ኮሎሪሜትሪክ የማጣሪያ ዘዴ መጠቀም ይቻላል።ይህ የማጣሪያ ዘዴ የፍላጎት ጂን ያካተቱ ክሎኖችን ለመለየት ይረዳል.

የኢንዛይም ኪነቲክስ ጥናቶች፡ ONPG የ β-galactosidase ኢንዛይም እንቅስቃሴን ለማጥናት ጠቃሚ ነው።የኢንዛይም-ንዑስ-ንዑስ ምላሽን መጠን በተለያዩ የንዑስ ፕላስቲኮች መጠን በመለካት እንደ ሚካኤል-ሜንቴን ቋሚዎች (ኪሜ) እና ከፍተኛ የግብረ-መልስ መጠኖች (Vmax) ያሉ የኪነቲክ መለኪያዎችን ማወቅ ይቻላል ።